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HE染色及其注意事项

正常对照组 (4).jpg

HE染色

苏木精-伊红染色法 ( hematoxylin-eosin staining ),简称HE染色法,石蜡切片技术里常用的染色法之一。染液为碱性,主要使细胞核内的染色质与胞质内的核酸着紫蓝色;伊红为酸性染料,主要使细胞质和中的成分着红色。HE染色法是组织学、、病理学教学与科研中最基本、使用最广泛的技术方法。

流程

1. 样品制备。对于贴壁生长细胞,胰酶消化,调整细胞浓度约1×105cells/ml,滴加于盖玻片上(置于6孔板中),培养相应时间后,取出细胞爬片,用PBS洗涤3次;

2. 样品固定。95%乙醇固定20minPBS洗涤2次,每次1min

3. 染核。苏木素染液染色2-3min,自来水洗涤;

4. 分色。镜下观察,若细胞核染色过深,用1%盐酸酒精溶液分色数秒,自来水洗涤;

5. 染胞质。浸入伊红染液染色1min,自来水洗涤;

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