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HE染色及其注意事项

6. 吹干或自然晾干细胞爬片后,中性树胶封片;

7. 显微镜观察,拍照

客户提供

1. 组织样本:

石蜡切片:甲醛固定的组织样本4度运输;

冰冻切片:新鲜组织样本,干冰运输;

2. 细胞样本:25T细胞培养瓶,灌满培养基新鲜运输或提供细胞冻存管,干冰运输;

3. 若客户已包埋好蜡块或制备好切片,可以提供;

4. 其余特殊样本需具体咨询

结果交付

1. 原始染色拍照结果图片,100×200x400x,每个样本提供3张照片;

2. 详细实验报告,含所需试剂耗材、仪器设备、操作过程。

注意事项

1. 染色时调节pH值很重要。如果组织块在福尔马林中固定时间长,组织酸化而影响细胞核着色。因此,要在自来水中冲洗时间长一些或在饱和碳酸锂水溶液中处理10-30min,这样可以使细胞核着色较深。染伊红时胞浆着色不佳,可在伊红溶液中滴加1-2滴冰醋酸。

2. 切片染苏木精后,分色这一步是关键,应在显微镜下控制进行,一般以细胞核染色清楚(晰)而细胞质基本无色为佳。如果过分延长分色时间将导致染色太浅,应重新染色后再行分色。

3. 切片经酒精脱水后,入二甲苯时可出现白色不透明状态,此为脱水不彻底,应将切片退回无水酒精,更换酒精、二甲苯,以求彻底脱水与透明。

4. 在染色过程中不要让切片干燥,以免切片收缩、变形,影响神经元形态。

5. 切片从二甲苯取出或进入二甲苯前,切片周边均应擦干净或吸干多余水分。

6. 最后封固时,要用中性树脂,防止日后褪色,盖片要选大于组织块的面积,如漏出一部分不久将会褪色,所用树脂浓度要适当,树脂封固时不能有气泡。


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